一、选择题（包括45小题，1-40每小题1分，41-45每题2分 共50分）

1.在基因工程中，科学家所用的“剪刀”、“针线”和“载体”分别是指( )

A.大肠杆菌、质粒、DNA连接酶 B.噬菌体、质粒、DNA连接酶

C.限制酶、RNA连接酶、质粒 D.限制酶、DNA连接酶、质粒

2.下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是（ ）

A. DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键

B. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖

C. DNA连接酶连接的是将单个的脱氧核苷酸连接到主链上

D.同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端

3.切取牛的生长激素基因，用显微注射技术将它注人小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理及表达过程是 ( )

A．基因突变 DNA→RNA→蛋白质 B．基因工程 RNA→RNA→蛋白质

C．细胞工程 DNA→RNA→蛋白质 D．基因重组 DNA→RNA→蛋白质

4.萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞，获得了高水平的表达。这一研究成果表明（ ）

①萤火虫与烟草植物的DNA结构基本相同 ② 萤火虫与烟草植物共用一套遗传密码子

③ 烟草植物体内合成了荧光素 ④ 萤火虫和烟草植物合成蛋白质的方式基本相同

A. ①③ B. ②③ C. ①④ D. ①②③④

5.在基因诊断技术中，所用的探针DNA分子中必须存在一定量的放射性同位素，后者的作用是（ ）

A. 为形成杂交的DNA分子提供能量 B. 引起探针DNA产生不定向的基因突变

C. 作为探针DNA的示踪元素 D. 增加探针DNA的分子量

6.科学家将β干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性，该生物技术为( )

A、基因工程?　　 ? B、蛋白质工程 C、基因突变??　? D、细胞工程

7．钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知（ ）

A．该生物的基因型是杂合的

B．该生物与水母有很近的亲缘关系

C．绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达

D．改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光

8．质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是 ( )

①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”

A.①②③④⑤⑥⑦ B．②④⑥ C.①③⑥⑦ D．②③⑥⑦

9．蛋白质工程的基本流程正确的是 （ ）

①蛋白质分子结构设计 ②DNA合成 ③预期蛋白质功能 ④据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列

A．①→②→③→④ B．④→②→①→③ C．③→①→④→② D．③→④→①→②

10．下列关于限制性内切酶识别的叙述不正确的是（ ）

A．从反应类型来看限制酶催化的是一种水解反应

B．限制性内切酶的活性受温度、酸碱度的影响

C．一种限制性内切酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列

D．限制性内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率越小

11．将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒 pET28b 导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列错误的是 （ ）

A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒

B．每个质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点

C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada

D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子

12．下列与基因工程无关的是( )

A、培养利用“工程菌”生产胰岛素 B、基因治疗 C、蛋白质工程 D、杂交育种

13．下列有关基因工程的应用中，对人类不利的是( )

A、制造“工程菌”用于药品生产 B、制造“超级菌”分解石油、农药

C、重组DNA诱发受体细胞基因突变 D、导入外源基因替换缺陷基因

14．在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是

A.人工合成目的基因 B.目的基因与运载体结合

C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测表达

15．下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是：

16．DNA 探针能检测到标本上的

A. 任意序列 B.遗传信息 C.蛋白质序列 D .细胞结构

17．下列叙述符合基因工程概念的是(　　)

A．B淋巴细胞与肿瘤细胞整合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因

B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株

C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株

D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上

18．与“限制酶”作用部位完全相同的酶是

A ．反转录酶 B． RNA聚合酶 C． DNA连接酶 D．解旋酶

19．科学家已能运用基因工程技术，让羊合成并由乳腺分泌抗体，相关叙述中正确的是(　　)

①该技术将导致定向变异 ②DNA连接酶把目的基因与载体黏性末端的碱基对连接起来

③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料 ④受精卵是理想的受体

A．①②③④　B．①③④ C．②③④ D．①②④

20．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是

A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因

B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA

C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列

D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白

21．已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是

A．3 B．4 C．9 D．12

22. 已知基因表达载体中的复制原点处比较容易打开双链，可以推断该处

A．A+T的比例较高

B．C+G的比例较高

C．位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位

D．位于基因的尾端，是转录停止的信号

23．基因芯片技术是近几年才发展起来的崭新技术，涉及生命科学、信息学、微电子学、材料学等众多的学科，固定在芯片上的各个探针是已知的单链DNA分子，而待测DNA分子用同位素或能发光的物质标记。如果这些待测的DNA分子中正好有能与芯片上的DNA配对的它们就会结合起来，并在结合的位置发出荧光或者射线，出现“反应信号”，下列说法中不正确的是：

A．基因芯片的工作原理是碱基互补配对

B．待测的DNA分子首先要解旋变为单链，才可用基因芯片测序

C．待测的DNA分子可以直接用基因芯片测序

D．由于基因芯片技术可以检测未知DNA碱基序列，因而具有广泛的应用前景，好比能识别的“基因身份”

24、在基因表达载体的构建中，下列说法不正确的是

①一个表达载体的必须组成成分包括目的基因、启动子、终止子

②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA

③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止

④所有基因表达载体的构建是完全相同的

A．②③ B．①④ C．①② D．③④

25、目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定与检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是(　　)

①检测受体细胞中是否有目的基因 ②检测受体细胞中是否有致病基因

③检测目的基因是否转录出了mRNA ④检测目的基因是否翻译成蛋白质

A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④

26、从基因文库中获取目的基因的根据是

A ．基因的核苷酸序列 B．基因的功能 C．基因的转录产物 mRNA D．以上都是

27. “工程菌”是指

A.用物理或化学方法诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系

B.用遗传工程的方法，把相同种类不同株系的菌类通过杂交得到新细胞株系

C.用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系

D.从自然界中选取能迅速增殖的菌类

28. 如果科学家通过转基因工程，成功的将一名女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常。那么，她后来所生的儿子中

A. 全部正常 B.一半正常 C.全部有病 D.不能确定

29. 蛋白质工程与基因工程相比，其突出特点是 (　　)

A．基因工程原则上能生产任何蛋白质

B．蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质

C．蛋白质工程可以不通过转录和翻译来实现

D．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第三代基因工程

30. 基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合，②将目的基因导入受体细胞，③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求，④提取目的基因，正确的操作顺序是（　）　　A．③②④① 　　B.②④①③ 　C．④①②③ 　D．③④①②

31.PCR技术扩增DNA,需要的条件是（ ） 　　

①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体

A.①②③④　　　　B.②③④⑤　　　C.①③④⑤　　 D. ①②③⑥

32、下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是

A．①②③④ B．①②④③

C．①④②③ D．①④③②

33抗虫棉的产生具有重大的意义，在抗虫棉产生过程中，毒蛋白基因的受体细胞是(　　)

A．棉花受精卵细胞 B．棉花分裂旺盛的体细胞

C．棉花的花粉粒 D．棉花任何细胞

34、在基因工程操作中，质粒的本质是双链DNA分子，下列功能不能由质粒完成的是( )

A、目的基因的转运 B、目的基因的扩增 C、目的基因的表达 D、目的基因的定位

35．下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是 （ ）

A．Taq酶能够在高温下促进DNA双链分子的复制

B．RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录

C．一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因

D．DNA聚合酶能在模板的指导下将多个脱氧核苷酸聚合形成长链

36．在基因工程技术中，下列方法与目的基因获得无关的是( )

A.辐射诱变法 B.PCR技术 C.反转录法 D.人工合成法

37．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是( )

A、促使目的基因导入宿主细胞中 B、促使目的基因在宿主细胞中复制

C、使目的基因容易被检测出来 D、使目的基因容易成功表达

38．有关基因工程的叙述正确的是 （ ）

A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成

C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料

39．细胞通过DNA损伤修复可使DNA在复制过程中受到损伤的结构大部分得以恢复。下图为其中的一种方式——切除修复过程示意图。下列有关叙述不正确的是

A．图示过程的完成需要限制酶、解旋酶、DNA聚合酶等的共同作用

B．图中二聚体的形成可能受物理、化学等因素的作用所致

C．图示过程涉及到碱基互补配对原则

D．DNA损伤修复降低了突变率，保持了DNA分子的相对稳定性

40．下图表示一项重要的生物技术，对图中物质a、b、c、d的描述，正确的是 (　　)

A．a的基本骨架是磷酸和核糖交替连接而成的结构

B．要获得相同的黏性末端，可以用不同种b切割a和d

C．c连接双链间的A和T，使黏性末端处碱基互补配对

D．若要获得未知序列d，可到基因库中寻找

41．人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是：甲生物的蛋白质mRNA目的基因与质粒DNA重组导入乙种生物的细胞获得甲种生物的蛋白质。下列说法正确的是(　　)

A．①过程需要的酶是逆转录酶，原料中含有A、U、G、C

B．③过程如果导入到的是微生物常用的方法是显微注射法

C．如果受体细胞是细菌，可以选用酵母菌、炭疽杆菌等

D．④过程中用到的原料包含氨基酸

42．基因污染是指在天然物种的DNA中嵌入了人工重组基因，这些外来基因可随生物的繁殖、传播而发生扩散。下列叙述错误的是(　　)

A．基因工程间接导致了基因污染

B．基因工程可破坏生物原有的基因组成

C．基因工程是通过染色体的重组发生基因交换，从而获得了生物的新性状

D．人类在发展基因工程作物时，没有充分考虑生物和环境之间的相互影响

43、科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，并以质粒为运载体，采用转基因方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品种。下列有关说法正确的是(　　)A.质粒是最常用的运载体之一，它仅存在于原核细胞中B.获得抗枯萎病基因并将其连接到质粒上，用到的工具酶限制酶和DNA聚合酶C.为了保证金茶花植株抗枯萎病，只能以受精卵细胞作为基因工程的受体细胞D.通过该方法获得的抗病金茶花，将来产生的配子不一定含抗病基因

44、采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是

A．可用基因枪法将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵

B．人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目，大于凝血因子氨基酸数目的3倍

C．在该转基因样中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中

D．人凝血因子基因开始转录后， DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA

45、基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。根据图示判断下列操作正确的是

A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

二、非选择题 （共五个大题 共50分）

46、（10分）糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致发达国家把它列为第三号“杀手”。

（1）目前对糖尿病Ⅰ型的治疗，大多采用激素疗法，所用激素为_____________，由_________________细胞分泌。

（2）让一健康人和糖尿病患者于空腹时同时口服葡萄糖，服用量按每人每千克体重1克计算，随后每隔一段时间，测定各人的血糖浓度，如图6—1所示，图中表示糖尿病患者的曲线是_______________________。

（3）这种治疗用的激素过去主要是从动物的内脏中提取，数量有限，20世纪70年代后，开始采用基因工程的方法生产，如图6—2所示，请回答：

①指出图中2、4、6、7的名称:

2_____________，4_____________，6_____________，7_____________。

②6的获得必须用_____________切割3和4，使它们产生相同的_____________，再加入适量的_____________酶，才可形成。

47、(8分)苏云金杆菌是一种对昆虫有毒害作用的细菌，其杀虫活性物质主要是一类伴孢晶体蛋白。伴孢晶体蛋白经昆虫肠液消化成毒性肽，并因此导致昆虫死亡。1993年，中国农科院科学家成功地将苏云金杆菌伴孢晶体蛋白基因转移到棉花细胞内，培育出抗虫棉。

(1)转基因技术能够________________________，因此，人们可以将不同种属间生物优良性状组合在一起，定向地改变生物的遗传性状。

(2)科学家培育出抗虫棉的基因操作一般要经历以下四个步骤：

①目的基因的获得:若已经知道了伴孢晶体蛋白的氨基酸序列，获得目的基因的最好方法是 ____________________ 。

②重组载体的构建：质粒是常用的运载体，科学家在进行上述操作时，要用同一种__________分别割质粒和目的基因。质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过 　　 而黏合。若目的基因的粘性末端如下图所示，则运裁体上能与之接合的粘性末端是：(在框内绘图作答)

DNA连接酶把两黏性末端连接起来形成重组载体。DNA连接酶实际上是形成了____________（化学健）。

③重组载体的转化和筛选。

④目的基因的表达和鉴定。

(3)如果将携带抗虫基因的重组质粒导入二倍体植物细胞，经培养、筛选获得一株有抗虫

特性的转基因植物。经分析，该植物的某一染色体携带有目的基因(因此可以把它看作是杂合子)。理论上，在该转基因植物自交F1代中，出现不具有抗虫特性的植物的概率是_______。

(4)种植上述转基因植物，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成"基因污染"。如果把目的基因导人叶绿体DNA中，就可以避免"基因污染"，原因是______________

48、(10分)利用基因工程生产蛋白质药物，经历了三个发展阶段。第一阶段，将人的基因转入细菌细胞；第二阶段，将人的基因转入小鼠等动物的细胞。前两个阶段都是进行细胞培养，提取药物。第三阶段，将人的基因转入活的动物体，饲养这些动物，从乳汁或尿液中提取药物。

（1）将人的基因转入异种生物的细胞或个体内，能够产生药物蛋白的原理是基因能控制　　　　　　　　　　　　。（2）人的基因能和异种生物的基因拼接在一起，是因为它们的分子都具有双螺旋结构，都是由四种____________构成，基因中碱基配对的规律都是　　　　　__________。（3）人的基因在异种生物细胞中表达成蛋白质时，需要经过　　　和翻译两个步骤。在翻译中需要的模板是　　　　　，原料是氨基酸，直接能源是ATP，将氨基酸的肽键连接成蛋白质的场所是________，“翻译”可理解为将由____个“字母”组成的核酸“语言”翻译成由　　　　个“字母”组成的蛋白质“语言”，从整体来看　　　　　　在翻译中充任着“译员”。（4）利用转基因牛、羊乳汁提取药物工艺简单，甚至可直接饮用治病。如果将药物蛋白基因移到动物如牛、羊的膀胱上皮细胞中，利用转基因牛羊尿液生产提取药物比乳汁提取药物的更大优越性在于：处于不同发育时期的　　　　　动物都可生产药物。

49、(8分) 随着科学技术的发展，化学农药的产量和品种逐年增加，但害虫的抗药性也不断增强，对农作物危害仍然很严重。如近年来，棉铃虫在我国大面积暴发成灾，造成经济损失每年达100亿以上。针对这种情况，江苏农科院开展“转基因抗虫棉”的科技攻关研究，成功地将某种能产生抗虫毒蛋白细菌的抗虫基因导入棉花细胞中，得到的棉花新品种对棉铃虫的毒杀效果高达80%以上。

就以上材料，分析回答：

（1）“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力，这表明棉花体内产生了抗虫的_____________物质。这个事实说明，害虫和植物共用一套_____________，蛋白质合成的方式是_____________的。

（2）“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程可表示为___________________。

（3）该项科技成果在环境保护上的作用是___________________。

（4）科学家预言，此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后，也将出现不抗虫的植株，此现象来源于___________。

（5）基因导入工程技术已在多方面得到应用，请各举一例说明该技术的应用可能带来的正负面影响。

（1） 一个图1所示的质粒分子经Sma I切割前后，分别含有______，_____个游离的磷酸基团。

（2） 若对图中质粒进行改造，插入Sma I 酶切位点越多，质粒的稳定性越___________。

（3） 用图中的质粒和外源ＤＮＡ构建重组质粒，不能使用Sma I切割，原因是____________。

（4） 与只是用EcoR I 相比较，使用BamH I和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________。

（5） 若同时使用上表4种酶切割质粒，则质粒被切割成几段_____________。

（6） 为了从cDNA 文库中分离获取蔗糖转基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖的能力的大肠杆菌突变体，然后在________________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。

参考答案

46（1）胰岛素 胰岛B （2）B （3）①质粒 目的基因（或胰岛素基因） 重组质粒 受体细胞（或大肠杆菌） ②同一种限制性内切酶 黏性末端 DNA连接

47（1）克服种属间远源杂交不亲和（2）①化学合成法②限制性内切酶　　碱基互补配对

磷酸二酯键

（3）1/4

（4）叶绿体中目的基因不会通过花粉传递给下一代

48

49答案： （2）毒蛋白 遗传密码 相同 （3）DNA（基因）→RNA→蛋白质 （4）减少农药对环境的污染，保护生态环境或生态平衡 （5）基因突变 （6）正面影响：基因诊断与治疗、转基因动植物与农牧业、仪器工业、环境监测、净化污染、生物制药等。负面影响：重组的基因可能使生物发生突变、生态遭破坏（减少生物多样性），滥用基因工程制造生物武器，重组基因的生物可能会产生一些难以预测的危害等。