一单项选择题(每小题2分,共50分)

1.下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是

A．制作果醋时应不断通入无菌空气

B．在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中，应采用平板划线法

C．腐乳制作过程中，料酒的用量过多，后期成熟时间延长

D．利用DNA和蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同提取DNA

2下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（ ）

A．可用包埋法制备固定化酵母细胞

B．反应产物对固定化酶的活性没有影响

C．葡萄糖异构酶固定前后专一性不同

D．固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应

3.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是

A．操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌和倒平板

B．将称好的牛肉膏去除称量纸后放入烧杯

C．待培养基冷却至50℃左右时倒平板

D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置

4下表是关于几种微生物能利用的碳源物质和氮源物质的描述，描述准确的微生物有几种(　　)

硝化细菌

圆褐固氮菌

甲烷氧化菌

乳酸菌



碳源物质

CO2

CO2

葡萄糖

葡萄糖



氮源物质

NH3

N2

尿素

N2





A．1种　　　　　　　　　 B．2种

C．3种 D．4种

5.图甲是果醋发酵装置。发酵初期不通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。图乙中能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是( )

A．① B．② C．③ D．④

6.下列关于微生物分离和培养的有关叙述，不正确的是

A．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度

B．测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法

C．提纯和分离严格厌氧型微生物，一般不用稀释涂布平板法

D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一氮源

7.关于胡萝卜素的提取，下列有关的叙述中不正确的是

A．一般来说，要想萃取效果好，需保证原料颗粒小，萃取温度高，时间长

B．用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率只受萃取剂的性质和使用量的影响

C．在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是防止有机溶剂的挥发

D．提取的胡萝卜素用纸层析法进行鉴定，若出现了和标准样品一样的层析带，说明实验成功

8.对于蒸馏法、萃取法、压榨法来提取芳香油各自的适用范围的叙述正确的一项是

A．蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油

B．压榨法适用于范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中

C．萃取法适用于提取柑橘、柠檬等易焦糊的原料

D．玫瑰油、薄荷油、熏衣草油等芳香油主要通过压榨法获得

9.下列有关PCR技术的实验过程叙述，不正确的是

A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，细胞内可利用解旋酶实现

B．操作过程要有一段已知目的基因的核苷酸序列

C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

D．PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高

10下列是关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，其中错误的是

A．利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度

B．若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照

C．将实验组和对照组平板倒置，370C恒温培养24-48小时

D．选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数

11.甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（ ）

粉状硫

10g

K2HPO4

4g

FeS04

0.5g

蔗糖

10g

(NH4)2SO4

0.4g

H20

100ml

MgS04

9.25g

CaCl2

0.5g



 I

+

+

+

+



+

+

+



 Ⅱ

+

十

+



+

+

+

+



 Ⅲ

+

+

+

+

+

+

+

+



A、甲、乙、丙都是异养微生物

B、甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物

C、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物

D、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物

12.在观察果胶酶对苹果匀浆的作用的实验中，将苹果匀浆放在90 ℃恒温水中保温4 min，其目的是 (　　)

A．杀灭苹果匀浆中的微生物

B．使果胶分解，从而提高出汁率

C．使果胶酶变性失活，以排除对实验的干扰

D．果胶酶的最适温度为90 ℃，此时酶的活性最高

13.对凝胶电泳的相关认识错误的是（??????）A、蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小??B、蛋白质在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小C、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离D、凝胶中加入SDS可以消除静电荷对迁移率的影响

14关于PCR引物的说法中，不正确的是(　　)

A．引物是PCR过程中与模板DNA部分序列互补，并能引导模板DNA的互补链合成的

脱氧核苷酸序列

B．引物常根据需要扩增的目标DNA的碱基序列用化学合成的方法获得

C．DNA聚合酶只能使DNA链从引物的3′端开始向引物的5′端延伸

D．引物的3′端必须具有游离的—OH基团

15.图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是

A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

B．划线操作须在火焰上进行

C．在5区域中才可以得到所需菌落

D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

16某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是 ( )

A．培养基分装到培养皿后进行灭菌

B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线

C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养

D．培养过程中每隔一周观察一次

17.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是

A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂

B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂

C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂

D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

18．从土壤中分离分解纤维素的微生物的实验中，先进行选择培养，再进行刚果红染色法分离。先进行选择培养的目的是(　　)

A．杀灭不需要的微生物

B．除去杂菌，获得能分解纤维素的纯种菌

C．浓缩目标菌种

D．在微生物的菌落上获得纤维素分解菌种

19.下列有关固定化酵母细胞制备步骤不恰当的是(　　)

A．应使干酵母与水混合并搅拌，以利于酵母菌活化

B．配置海藻酸钠溶液时要用小火间断加热的方法

C．向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母细胞，充分搅拌并混合均匀

D．将酵母细胞混匀的海藻酸钠溶液中注入CaCl2溶液中，会观察到CaCl2溶液中有球形的凝胶珠形成

20.使用凝胶色谱法分离蛋白质时，洗涤红细胞、释放血红蛋白和透析过程中，分别使用下列哪些试剂(　　)

①蒸馏水　②生理盐水　③20 mmol/L的磷酸缓冲液　④清水　⑤柠檬酸钠

A．①③⑤ B．①②③

C．②①③ D．④①③

21.在玫瑰精油提取过程中，依次用到清水、NaCl、无水Na2SO4，它们的作用分别是(　　)

A．溶解、萃取、除水

B．蒸馏、萃取、除颗粒杂质

C．蒸馏、油水分层、除水

D．溶解、油水分层、萃取

22.在用胡萝卜做菜时，菜中浮油会呈现出橘黄色，为了增加胡萝卜中营养物质的吸收，在进食胡萝卜的同时，应(　　)

A．多喝水 B．多吃蛋白质类食品

C．多吃脂质食品 D．多吃蔬菜

23.下列叙述不正确的是(　　)

A．从操作角度来考虑，固定化细胞比固定化酶更容易

B．固定化细胞比固定化酶对酶活性的影响更小

C．固定化细胞固定的是一种酶

D．将微生物的发酵过程变成连续的酶反应，应选择固定化细胞技术

24.多聚酶链式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，其简要过程如下图所示。下列关于PCR技术叙述不正确的是 ( )

A.PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术

B.反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板

C.PCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增

D.应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变

25. 若将某种细菌置于有营养的物体上，它会繁殖并形成细胞群（如下图）。有什么适当的实验可以用来检验两种抗生素的杀菌效用？

第Ⅱ卷

二非选择题（共50分





26（10分

PCR技术是分子生物实验的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制的特性，在试管中进行DNA的人工复制，请回答：

（1）PCR新合成的DNA分子与模板DNA分子完全相同的原因是：（每空1分）

和 。

（2）PCR反应过程中需要DNA聚合酶参与的是 阶段（ 1分）

（3）在遗传病及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析，PCR技术能快速扩增DNA片段，请在左图相应的横线上写出引物Ⅱ，并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。 (4)PCR反应过程的前提条件是________，PCR技术利用了DNA的________原理解决了这个问题。

（5）获取目的基因时至少要经过 次循环才能从DNA分子中分离出目的基因，（ 3分）　

27每空1分共8分）

下面是某校某班同学在“生物技术实践”课中进行的实验，请回答： ?(1)在20世纪50年代，酶已经大规模地应用于各个生产领域，到了70年代又发明了固定化酶与固定化细胞技术。在实际生产中，固定化酶技术的优点是________________________________________________与固定化酶技术相比，固定化细胞固定的是________。在制备固定化酵母细胞的实验中，常用的包埋材料是________。

?(2)某一同学运用PCR技术，准备对分离得到的大肠杆菌一个DNA分子进行体外扩增。他往扩增仪中加入模板DNA、四种脱氧核苷酸，此外还应加入________ 和___________。?DNA体外扩增过程包括了三个连续的步骤分别是变性、______和________。

?(3)还有同学将大肠杆菌破碎并提取得到大肠杆菌蛋白质，一同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的带电性质，分子大小以及分子的形状等。而另一位同学则利用凝胶色谱法分离蛋白质，待蛋白质接近色柱底端时，用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是________ 。

28.（ 每空2分16分、）

（1）请回答关于生物技术的以下问题：

（1）在花药离体培养过程中，选择花药时一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。一般来说，在 期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的方法是 。为此，通常选择 ___________的花蕾。

（2）若提供花粉的植株基因型为AaBb，利用单倍体育种的方法获得的任意一个植株，其基因型与提供花粉的植株相同的可能性为 。

(3)确定植物有效成分提取的方法时，要根据所要提取的有效成分的理化性质进行。三七是一种名贵中药，其有效成分是三七皂苷，这是一种非脂质有机物。那么从三七中提取该物质，可以考虑的提取方法是 ，考虑到提取物是一种口服药物，最好使用 来提取。为了提高提取率，提取前应对三七材料进行预处理，即对其进行 。如果是提取花生油，最简便的方法是 。

29(16分，每空2分)

某工厂生产了一种加酶洗衣粉，其包装袋上印有如下部分说明。

成分：含碱性蛋白酶等

用法：洗涤前先将衣物浸泡于含洗衣粉的水中数小时；使用温水效果更佳。

注意：①切勿用于洗涤丝质和毛质衣料。②用后需要彻底清洗双手。

请回答以下问题：

(1)质检局针对该洗衣粉设计了如图所示的实验进行检验，该实验的目的是______________。

(2)某学生为探究该洗衣粉中酶催化作用的最适温度，参考上述实验(1)的实验材料及方法进行了有关实验，并把实验结果用右图的曲线表示。

①该实验中，温度、pH分别属于__________变量、________________变量。

②由图可知，使用该加酶洗衣粉的最适宜温度约为______________。

③在0℃和75℃时，酶的催化效率基本都降为零，但温度再度回到45℃，后者的催化作用已不能恢复，这是因为_________________________________________________。

④该学生在实验过程中可通过直接测定_________________________作为指标来表示酶的催化效率。

(3)该加酶洗衣粉不能用于洗涤丝质和毛质衣物，其主要原因是_________________。

(4)为什么用后需要彻底清洗双手？ ___________________________________。